生物膜具有极强的抗清洗、抗灭菌特性，是医疗感染控制的重点难点，若清洗剂无法有效去除生物膜，残留的微生物会快速繁殖引发院内感染，而规范的医用清洗剂生物膜去除效果试验能精准检测清洗剂的生物膜剥离能力、长效抑菌效果，为产品质量判定提供客观数据，既保障了患者诊疗安全，也为医疗行业清洗流程规范化提供了技术支撑，是医疗安全体系中不可或缺的重要环节。

　　医用清洗剂生物膜去除效果试验流程

　　1.准备与生物膜制备（3关键动作）

　　载体：316L不锈钢片（10mm×10mm）或聚四氟乙烯管（内径1.5mm、长5cm），灭菌备用；

　　菌液：铜绿假单胞菌/金黄色葡萄球菌（耐药菌加鲍曼不动杆菌），浓度1×10⁷CFU/mL；

　　培养：载体浸菌液，平整表面37℃摇床培养48h，管腔密封培养5天，SEM验证生物膜致密即合格。

　　2.清洗处理（3步标准化）

　　配液：按说明书浓度（如多酶1∶270），45℃去离子水稀释；

　　处理：浸泡10min→超声清洗（300W、40kHz，5min）→管腔额外高压冲洗（0.2MPa）；

　　漂洗：无菌水冲洗3次，每次30s。

　　3.采样与检测（抓核心方法）

　　采样：清洗后1h内，平整载体用采样棒擦拭后浸入5mL洗脱液，管腔注入3mL洗脱液振荡5min；

　　检测：

　　活菌计数（仲裁）：洗脱液稀释涂布，37℃培养48h计数；

　　ATP快速检测：取1mL洗脱液加试剂，读RLU值（3次取平均）；

　　形态学：SEM观察残留，LSCM测厚度（可选，辅助判定）。

　　4.数据处理

　　计算：清除率=（初始-残留）/初始×100%，活菌数下降率同理；

　　记录：留存载体类型、清洗剂浓度、关键检测数据及操作人员。

　　医用清洗剂生物膜去除效果试验判定标准

　　（1）核心判定标准

　　（2）判定流程与结果分类

　　判定流程：先验证方法学指标（精密度、回收率）→再核查核心性能指标（清除率、活菌数下降率、ATP值）→最后参考形态学指标（残留厚度、EPS量）；

　　结果分类：

　　合格：所有指标满足对应等级要求，可标注“符合T/WSJD002-2019XX类清洗剂要求”；

　　条件合格：核心性能指标达标，但形态学指标接近阈值（如EPS残留4.8μg/cm²），需补充3次重复试验，均达标方可判定合格；

　　不合格：任一核心指标未达标（如管腔清除率88%），或方法学验证失败，直接判定不符合标准。