如何评价化妆品美白功效?体外测试法及在体测试法详细介绍


皮肤颜色是人体皮肤表面呈现出的色度、色泽,是判断皮肤、身体健康与否的重要标准。随着人们对美白化妆品需求的增长,宣称具有美白功效的化妆品及其原料的产品与日俱增。那么,如何科学、客观地评价化妆品及其原料的美白功效呢?
中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心,经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作,可提供化妆品美白功效评价、化妆品安全性评价、化妆品安全检测等化妆品安全相关服务。
化妆品美白功效评价方法:体外测试法
(一)酪氨酸酶活性抑制实验
人体肤色的差异主要取决于黑色素的含量及其分布,黑色素主要形成于人体皮肤表皮基底层的黑色素细胞,黑色素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶等酶的作用下,经多巴、多巴醌、多巴色素、二羟基吲哚等中间体逐步转化为真黑色素。其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶,其活性大小决定黑色素形成的数量。对酪氨酸酶抑制作用的强弱可作为评价增白化妆品的重要参考指标。
酪氨酸酶活性抑制试验是利用从蘑菇中提取到的酪氨酸酶,以-酪氨酸或L-多巴为底物,在体系中加入待测物、对照品和酪氨酸酶等成分进行反应,并测量其吸光值,计算得到酪氨酸酶抑制率,从而表征待测物对酪氨酸酶活性的抑制。
(二)抗氧化、抗炎试验
由于紫外线、体内代谢等内外因素均会促使机体产生氧自由基、炎症因子等。自由基是人体代谢过程中产生的一种垃圾毒素,人类很多疾病的产生都与自由基有关,自由基可直接或间接调控酪氨酸酶的表达,调控黑色素的合成,引起皮肤炎症、加速皮肤黑色素的产生。所以,抑制自由基的产生从一定程度上可以抑制黑色素的产生。常见的自由基有:DPPH、ABTS、超氧阴离子、羟自由基等。可通过测试样品对自由基的抑制率从而表征活性物的抗氧化、美白活性。
(三)黑色素细胞中的黑色素含量测定实验
黑色素细胞是机体形成黑色素、分泌黑色素的细胞,是皮肤细胞的重要组成之一。所以,通过细胞生物学法测定黑色素细胞中黑色素含量,是最有力的检测美白产品的方法。
该实验多通过在体外培养特定的黑色素瘤细胞模型,采用分光光度法、图像分析技术等方法测试细胞内酪氨酸酶活性及黑色素含量,从而对待测物质的美白功效进行评价。为更好地模拟人皮肤中黑色素细胞的生长、黑色素的分泌,研究黑色素细胞与角质形成细胞间的相互作用和美白功效评价,现代生物技术还常常采用黑色素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型。
(四)黑色素的转移
黑色素生成后需要进行转移才能到达表皮层,该过程分为两步:胞内转移和胞外转移。胞内转移是黑色素细胞受刺激产生的黑色素体,包裹在黑色素细胞中向突起末端迁移。所以,可以通过探究受试物抑制黑色素小体转移的方法,进而评价其美白功效。
角质形成细胞黑色素摄取实验先在正常人表皮角质形成细胞培养中加入受试物,后加入带有荧光的黑色素颗粒,孵化4h后测量培养基中剩余荧光剂量,以此表示抑制物对黑色素转移的抑制效果。
化妆品美白功效评价方法:在体测试法
(一)皮肤颜色测试
客观仪器评估是通过仪器对受试者使用化妆品前后的皮肤状态参数进行采集,进而对化妆品进行功效评价的一种方法,以数据或图片的形式呈现出来,可以最大限度消除人为因素的影响。
(二)皮肤红黑色素测试
皮肤的颜色主要由皮肤色素含量及其分布决定,人类皮肤的颜色主要取决于人体皮肤中黑色素和血红素(红色素)的含量,快速、准确地测量皮肤中黑色素和血红素的含量在化妆品的研制、医疗、美容、药品和保健品功效检测方面是非常重要的。MexameterMx18也是常用的测定皮肤色度的一种仪器,其结果输出以黑色素指数(MI)和红斑指数(EI)表示,它是基于光谱吸收的原理(RGB),通过特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素含量,如果测量所得MI越高,说明皮肤中所含的黑色素就越高。
(三)皮肤黑色素含量测试
皮肤颜色是由皮肤中几种发色团的存在和比例引起的,主要包含皮肤中的黑色素、血红素、类胡萝卜素的含量与分布。皮肤黑色素含量测试是一种客观的分析方法,可使用光密度测量法量化角质层中黑色素的含量。
使用透明胶带(氰基丙烯酸酯皮肤表面剥离剂(CSSSs)等)等将受试者的皮肤角质层剥离,然后将剥离的样品用Fotana-Masson银染色,将样品置于配有内部光密度计的显微镜下,测定样品的光透射率,并以220放大倍率拍摄。使用0-10级的灰度判别来评估颜色的密度,从而通过计算来测定角质层细胞中的黑色素含量。
(四)皮肤光泽度测试
光泽度是构成物质表面视觉特征的重要参数之一。皮肤光泽度直接关系到光线进入人眼时的视觉效果,平时我们所说的容光焕发指的就是皮肤的光泽度。所以,测定皮肤的光泽度一定程度上也可以表征皮肤的美白效果。
(五)VISIA拍照
应用VISIA拍照,通过对图像的分析也可以评价化妆品的美白功效。对于美白功效评价可选用标准光、UV光和交叉偏振光采集面部图像,并使用图像分析软件进行量化分析,以评估皮肤颜色的变化。
(六)主观评价法
主观评价法包括专家评估和志愿者自我评估两种方法。专家评估多采用有经验的专家通过使用产品前、后肤色的变化就行评分,从而表征志愿者使用产品前后肤色的变化。志愿者自我评估多采用调查问卷的形式,志愿者对自我肤色的改善情况进行评估。但主观评价法多与客观仪器评价等其他方法结合,从而全面地表征化妆品的美白功效。
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