润肤膏霜霉菌总数检验主要基于霉菌在特定培养基上的生长特性。霉菌在适宜的营养、温度、湿度等条件下，能够在培养基中摄取养分并不断繁殖，形成肉眼可见的菌落。通过将润肤膏霜样品进行稀释处理，使其中的霉菌均匀分散，再将稀释液接种到适合霉菌生长的培养基上，经过一定时间的培养，培养基上生长出的霉菌菌落数量，就能够反映出原润肤膏霜样品中的霉菌含量情况。

　　润肤膏霜霉菌总数检验方法

　　（1）样品稀释

　　称取25g润肤膏霜样品，放入装有225mL无菌生理盐水并带有玻璃珠的三角瓶中。玻璃珠的作用是在振荡时，帮助将样品充分分散，使霉菌均匀分布在生理盐水中。使用电动振荡器或手摇振荡，振荡时间不少于20分钟，确保样品与生理盐水充分混合，得到1:10的样品匀液。

　　用1mL无菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入装有9mL无菌生理盐水的试管中，吹吸3次，使充分混匀，此为1:100的稀释液。换用一支1mL无菌吸管，从此试管中吸取1mL稀释液，注入另一装有9mL无菌生理盐水的试管中，再次混匀，制成1:1000的稀释液。依此类推，根据样品中霉菌污染程度的预估，可继续进行适当倍数的稀释，如1:10000等。

　　（2）接种培养

　　根据对样品霉菌污染程度的初步判断，选择2-3个适宜稀释度的稀释液。例如，若怀疑样品霉菌污染程度较高，可选择1:100、1:1000、1:10000三个稀释度。用无菌吸管分别吸取0.1mL不同稀释度的稀释液，注入无菌培养皿中，每个稀释度重复2-3个培养皿。

　　将冷却至（46±1）℃的孟加拉红培养基倾注到含有稀释液的培养皿中，每皿约15-20mL，迅速轻轻摇匀，使稀释液与培养基充分混合。待培养基凝固后，将培养皿倒置放入（28±1）℃的恒温培养箱中培养5-7天。倒置培养皿是为了防止培养过程中产生的冷凝水落到培养基表面，影响霉菌菌落的生长和计数，同时也可减少外界微生物对培养基的污染。

　　（3）菌落计数

　　培养结束后，从恒温培养箱中取出培养皿，在明亮处进行霉菌菌落计数。选择菌落数在10-150CFU之间的培养皿进行计数。若所有稀释度的培养皿中菌落数均大于150CFU，则选择菌落数最多的稀释度，计数该稀释度下培养皿中的全部菌落数；若所有稀释度的培养皿中菌落数均小于10CFU，则选择菌落数最少的稀释度进行计数。

　　计数时，注意区分霉菌菌落与其他杂质或细菌菌落。霉菌菌落一般较大，形态多样，如绒毛状、絮状、蜘蛛网状等，颜色丰富，有黑色、绿色、黄色、白色等；而细菌菌落相对较小、光滑湿润。对于难以区分的菌落，可借助显微镜进一步观察其形态特征，以准确判断是否为霉菌菌落。

　　计算霉菌总数时，先计算同一稀释度下两个或多个培养皿中霉菌菌落数的平均值，再乘以相应的稀释倍数，即为每克润肤膏霜样品中的霉菌总数（CFU/g）。例如，1:1000稀释度的三个培养皿中霉菌菌落数分别为35、40、45CFU，其平均值为（35+40+45）÷3=40CFU，则样品中的霉菌总数为40×1000=40000CFU/g。