微生物检测对于确保化妆品的安全性至关重要，能够及时发现并控制潜在的微生物污染，保障消费者的健康和安全。根据《化妆品安全技术规范》2015版规定，不同种类的化妆品有不同的微生物限值标准。化妆品微生物检测有哪些方法及步骤？

　　化妆品微生物检测方法及步骤

　　1.‌样品准备‌：

　　从化妆品成品中无菌操作取样，通常采集一定量的样品‌。

　　根据样品特性，可能需要进行稀释、加热、搅拌或超声处理以促进溶解‌。

　　2.‌接种与培养‌：

　　将样品或稀释后的样品接种到含有营养成分的培养基中，培养基能让细菌或真菌生长‌。

　　将接种了样品的培养基放入恒温培养箱中进行培养，一般需要24-72小时，具体时间取决于微生物的生长速度‌。

　　3.‌观察与计数‌：

　　培养一定时间后，观察培养基上生长的菌落，通过菌落的形态、大小和颜色等特征初步判断是细菌还是真菌‌。

　　使用菌落计数器来计数可见的菌落数量‌。

　　4.‌鉴定与分析‌：

　　如果需要确定微生物的种类，可以进一步进行生化鉴定或分子生物学鉴定，如使用API系统或16SrRNA基因测序‌。

　　根据培养和鉴定的结果，分析化妆品中微生物的污染程度和种类‌。

　　5.‌结果报告‌：

　　编写测试报告，包括测试条件、观察到的菌落数量、鉴定结果等‌。

　　6.‌质量控制‌：

　　在检测过程中，确保所有操作符合生物安全要求，所用器皿及材料均应事先灭菌，防止微生物的再污染和扩散‌。

　　化妆品微生物检测项目

　　1、菌落总数：化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后(如培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等)，1g(1mL）检样中所含菌落的总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中性的需氧性和兼性厌氧菌落总数。

　　2、霉菌和酵母菌总数：化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。

　　3、耐热大肠菌群：—群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌,在44.5℃培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。

　　4、金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞,无荚膜，能分解甘露醇，血浆凝固酶阳性。

　　5、铜绿假单胞菌：属于假单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿脓菌素。此外还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐，在42℃±1℃条件下能生长。