助勃剂皮肤变态反应试验是指通过动物实验，观察助勃剂及其成分接触皮肤后，是否引发机体免疫系统介导的迟发性变态反应的检测方法，核心是评估受试物作为接触性变应原的潜在风险。该试验作用在于明确助勃剂使用过程中接触皮肤时，是否可能导致使用者出现皮肤瘙痒、红斑、丘疹、水疱等过敏反应，为助勃剂的安全性评价提供关键依据，同时指导产品配方优化、使用说明制定，保障消费者使用过程中的皮肤安全。

　　助勃剂皮肤变态反应试验方法步骤

　　1、试验准备

　　选取健康白色豚鼠（体重250-300g），每组10-20只，随机分为试验组、阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（2,4-二硝基氯苯）。

　　试验前24小时，用脱毛剂去除豚鼠背部左侧（致敏区）和右侧（激发区）皮肤毛发，脱毛面积各约3cm×3cm，确保皮肤无破损。

　　样品制备：助勃剂若为液体，直接使用原液或按实际使用浓度稀释；若为固体，用无菌生理盐水或适宜溶剂制成5%-10%的混悬液（确保样品均匀分散）。

　　2、致敏阶段（共3次，间隔7天）

　　取0.2mL（或0.2g）制备好的样品，均匀涂敷于豚鼠背部左侧致敏区皮肤，用无菌纱布覆盖后，以无刺激性胶带固定封闭接触6小时。

　　每次致敏结束后，用温水轻柔清洗致敏区皮肤，去除残留样品，避免用力揉搓损伤皮肤。

　　严格按间隔时间完成3次致敏，期间观察豚鼠是否出现异常行为或皮肤反应，记录相关情况。

　　3、激发阶段（末次致敏后14天）

　　取0.2mL（或0.2g）相同浓度的样品，涂敷于豚鼠背部右侧激发区皮肤，同样采用封闭接触方式，持续6小时。

　　阴性对照组涂敷等量生理盐水，阳性对照组涂敷适宜浓度的2,4-二硝基氯苯，操作流程与试验组一致。

　　激发结束后，用温水清洗激发区皮肤，去除样品残留。

　　4、观察与评分

　　激发后24小时、48小时、72小时，分别观察并记录三组豚鼠激发区皮肤反应。

　　按规范评分标准判定：无反应计0分，轻微红斑计1分，明显红斑计2分，红斑+水肿计3分，红斑+水肿+水疱计4分。

　　计算试验组致敏率（出现过敏反应的豚鼠数量/试验组总数量×100%），结合评分结果判定产品是否存在皮肤变态反应风险。